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更新時(shí)間:2025-02-10
所有產(chǎn)品僅供科研使用,不能用于食用和醫(yī)療等
活性氧ROS檢測(cè)試劑盒(綠色熒光)
1. 本試劑盒特別適用于貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞活性氧的檢測(cè)。對(duì)于動(dòng)物組織樣本而言,應(yīng)盡量選擇新鮮組織,勻漿操作應(yīng)盡量快速,以減少實(shí)驗(yàn)誤差,如果樣本已經(jīng)凍存,則無(wú)法保證檢測(cè)結(jié)果的可靠性。
2. DCFH-DA可稀釋于培養(yǎng)基或緩沖液中。血清或培養(yǎng)基的顏色并不會(huì)影響DCFH-DA及細(xì)胞內(nèi)熒光的產(chǎn)生,但可能會(huì)影響熒光顯微鏡觀察,干擾熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀或流式細(xì)胞儀的熒光測(cè)定。如果用上述儀器進(jìn)行測(cè)定時(shí),可將DCFH-DA稀釋于無(wú)酚紅培養(yǎng)基或適宜的緩沖液如PBS中。
3. 加入DCFH-DA的時(shí)機(jī)和孵育時(shí)間,以至能順利檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧為目的。當(dāng)細(xì)胞藥物處理時(shí)間較短(如<2 小時(shí))或預(yù)計(jì)ROS效應(yīng)較弱時(shí),可將DCFH-DA在藥物處理之前或者與藥物同時(shí)加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中;反之,當(dāng)藥物處理時(shí)間較長(zhǎng)(如>6小時(shí))或預(yù)計(jì)產(chǎn)生ROS效應(yīng)較強(qiáng)時(shí),可將DCFH-DA在藥物處理之后再加入。
4. 活性氧供體內(nèi)含高純度12 mM 的H2O2。加入細(xì)胞后可使DCFH-DA氧化為DCF呈現(xiàn)強(qiáng)綠色熒光。該試劑的細(xì)胞工作濃度為20-100 µM或更低濃度,當(dāng)其濃度超過(guò)200µM時(shí),將產(chǎn)生細(xì)胞毒性。如果用戶(hù)熟悉ROS熒光或?qū)嶒?yàn)沒(méi)有必要采用陽(yáng)性對(duì)照,可以不加該試劑。一般情況下,活性氧供體加入到細(xì)胞30min左右即可產(chǎn)生明顯的綠色熒光。
活性氧ROS檢測(cè)試劑盒(綠色熒光)